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    原代細胞培養(yǎng)體系是研究細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的重要工具

    發(fā)布時間： 2023-03-10　　點擊次數(shù)： 1682次
    　　原代細胞培養(yǎng)體系是在無血清的條件下，使用營養(yǎng)液和適合細胞生長的基質(zhì)來培養(yǎng)從動物體內(nèi)取得、未經(jīng)過培養(yǎng)和分離的原代細胞。這種培養(yǎng)方法可以維持細胞的各種原始性狀，包括形態(tài)、基因表達模式、生長倍增時間、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑等等。

    　　在原代細胞培養(yǎng)體系中，細胞通常是在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中生長的。為了維持細胞的正常生長，需要提供充足的營養(yǎng)物質(zhì)、適宜的氧氣濃度和pH值，并且要保持細胞培養(yǎng)容器的清潔和無菌狀態(tài)。在培養(yǎng)細胞的過程中，有時也需要添加一些生長因子、膠原蛋白和膠原酶等物質(zhì)，以促進細胞生長和分化。

    　　為了儲存原代細胞，可以采用低溫保存或凍存的方法。低溫保存一般使用液氮或干冰等高質(zhì)量的低溫冰霜來存儲細胞。在凍存細胞時，一般會將細胞懸浮在含有10% DMSO（二甲基亞砜）的培養(yǎng)基中，然后將其置于液氮中。這種方法可以保證細胞的正常存活，并可以長期保存細胞。
     

     

    　　原代細胞培養(yǎng)體系指的是從組織或器官中取得的初代細胞，通過分離和培養(yǎng)形成的體系。它是研究細胞生物學(xué)和生物醫(yī)學(xué)的重要工具。

    　　原代細胞的分離和培養(yǎng)一般包括如下步驟：

    　　1. 制備工具和試劑。需要準(zhǔn)備顯微鏡、離心機、生物安全柜、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、酶、抗生素等。

    　　2. 取得組織樣本?？梢允莿游锘蛑参锏母鞣N組織，如肝臟、腎臟、胃等。

    　　3. 組織消化。將組織切碎成小塊，加入酶或蛋白酶等消化酶，使細胞質(zhì)解除，細胞分離。

    　　4. 細胞篩選。將細胞溶液過篩，去除多余的物質(zhì)如組織碎片等，留下單個的生物細胞。

    　　5. 培養(yǎng)基配制。根據(jù)細胞類型和需求配制不同的培養(yǎng)基，增加適當(dāng)?shù)臓I養(yǎng)成分、生長因子、抗生素等。

    　　6. 細胞培養(yǎng)。將分離出的細胞加入培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)?？梢允褂门囵B(yǎng)皿、培養(yǎng)瓶和生物反應(yīng)器等設(shè)備。

    　　7. 細胞觀察和維護。在培養(yǎng)過程中觀察細胞的生長、形態(tài)和功能。定期更換培養(yǎng)液、抗生素，定期排除細胞污染。

    　　8. 細胞傳代。當(dāng)細胞至達定量時，需要進行傳代，即分離細胞，并重新進行培養(yǎng)。傳代的次數(shù)通常在3-10次。

    　　如此反復(fù)培養(yǎng)、傳代，可形成成系列化的原代細胞體系。成系列化的原代細胞可以應(yīng)用于各種生物醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)研究，如疾病的研究、細胞治療、藥物篩選等。