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人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株
更新時(shí)間：2024-12-26
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廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
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人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株特性介紹
一個(gè)胰腺癌病人的腹水中的細(xì)胞移植到裸鼠后建立了這個(gè)細(xì)胞株。
注：本培養(yǎng)基是不直接添加吉西他濱藥物的。如果客戶需要直接添加的我們可以按照客戶的意愿添加吉西他濱藥物。
細(xì)胞特性
1） 來源：ASPC-1耐藥篩選
2） 形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1×10^6 細(xì)胞數(shù)
4） 用途：僅供科研使用
人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞吉西他濱耐藥株特性運(yùn)輸、保存及注意事項(xiàng)
復(fù)蘇細(xì)胞 | 凍存細(xì)胞 | |
包裝 | 充液的T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 1mL凍存管 |
運(yùn)輸條件 | 常溫 | 干冰 |
保存方式 | 75%酒精消毒瓶壁，置于37℃恒溫細(xì)胞培養(yǎng)箱 | -80℃冰箱中保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮/立即復(fù)蘇 |
注意事項(xiàng) | 1. 收到細(xì)胞請先就培養(yǎng)瓶/凍存管的外觀、細(xì)胞的狀態(tài)，進(jìn)行拍照并保存，如有問題請及時(shí)聯(lián)系我們； 2. 收到的復(fù)蘇細(xì)胞，若有較多細(xì)胞飄起，可能由于運(yùn)輸導(dǎo)致。請先置于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置2~4h，待細(xì)胞貼壁后再做處理； 3. 復(fù)蘇細(xì)胞充液培養(yǎng)基為不含藥物的維持培養(yǎng)基，收到細(xì)胞后請及時(shí)更換為CM培養(yǎng)基； 4. 建議收到細(xì)胞后，首先進(jìn)行擴(kuò)增，并凍存部分細(xì)胞以備用。 | |
細(xì)胞耐藥誘導(dǎo)過程
待細(xì)胞生長穩(wěn)定后，開始倍增藥物誘導(dǎo)劑量，每個(gè)劑量保持至細(xì)胞可以穩(wěn)定生長至匯合度達(dá)50%以上。遞增藥物濃度依次為：0.03μg/mL、0.3μg/mL、1.5μg/mL、3μg/mL、6μg/mL、12μg/mL、18μg/mL。約10個(gè)月后，細(xì)胞可在18μg/mL GEM藥物濃度下穩(wěn)定生長，視為耐藥細(xì)胞株構(gòu)建成功，并命名為ASPC-1/GEM。
細(xì)胞培養(yǎng)試劑的配制
1）GEM藥物的配制及保存
建議將GEM藥物配制成18mg/mL的母液：即使用1mL DMSO溶液溶解18mg GEM藥物，使其全部溶解。
注意：可根據(jù)用量配置藥物，并將藥物分裝保存，避免反復(fù)凍融導(dǎo)致藥物失效。溶解后的GEM，4℃保存1周，-20℃保存1個(gè)月，-80℃保存6個(gè)月。
2）凍存液的配制
90%優(yōu)質(zhì)胎牛血清+10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
3）CM培養(yǎng)基的配制（推薦使用iCell-h005-001b）
成分 | 體積/濃度 |
優(yōu)質(zhì)胎牛血清 | 10% |
雙抗 | 1% |
GlutaMAX-1 | 1% |
GEM | 0~18μg/mL |
DMEM培養(yǎng)基 | 補(bǔ)充至所需體積 |
細(xì)胞培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%；溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%~80%。
